本試薬キットは、臨床検体中のヒト乳頭腫ウイルス(HPV)タイプ26および51のDNAをリアルタイムPCR法により検出することを目的としています。キットにはリアルタイムPCR用の試薬のみが含まれています。
はじめに
「MOLgen DNA HPV 26/51 S1 Kit は、臨床検体(上皮細胞スワブ)中のヒトパピローマウイルス(HPV)26 型および 51 型の DNA を、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(PCR)法と増幅産物の蛍光検出法を用いて検出するためのキットです。
臨床検体からのDNA抽出は、"Molgen Universal Extraction Kit "を用いて行うことができる。他社製のNA抽出キットを使用する場合は、Adaltis S.r.l.社製のInternal Control sample (IC)を使用することを強く推奨する。
PCR分析の結果は、複雑な疾患の診断において考慮される。
セット1は、AMPLIlab (Adaltis), iQ5 iCycler, CFX96 (Bio-Rad, USA), DT-96 (DNA-Technology, Russia)などのブロック型PCRサイクラーでの使用を想定しています。
セット1には、コントロールサンプルを含む96テストに必要な試薬が含まれています。
方法の原理
リアルタイムPCRは、反応の進行に伴って増加するレポーター分子によって産生される蛍光の検出に基づく。レポーター分子は、病原体DNAの標的領域に特異的に結合する二重標識DNAプローブである。蛍光シグナルは、増幅中にTaq DNAポリメラーゼのエキソヌクレアーゼ活性によって蛍光色素とクエンチャーが分離されることで増加する。PCRはDNAの温度変性、プライマーのアニーリング、相補鎖の合成というサイクルを繰り返す。
閾値サイクル値(Ct)は、反応中に発生する蛍光が閾値を超えるサイクル数である。
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