本試薬キットは、臨床検体中のガードネレラ膣炎DNAをリアルタイムPCR法により検出するためのものです。キットにはリアルタイムPCR用の試薬のみが含まれています。
はじめに
「Molgen DNA Gardnerella vaginalis S1 Kit」は、臨床検体(上皮細胞スワブ、精液、前立腺液、尿)から抽出したガードネレラ膣炎DNAを、増幅産物の蛍光検出を伴うリアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(PCR)法により検出するためのキットです。
セット1はブロック型PCRサイクラーでの使用を想定している:iQ5 iCycler、CFX96(Bio-Rad、米国)、DT-96(DNA-Technology、ロシア)。
DNAの抽出は "MOLgen Universal Extraction Kit "を用いて行うことができる。
他社製のNA抽出キットを使用する場合は、Adaltis社製のInternal Control sample (IC)を使用することを強く推奨する。
セット1には、コントロールサンプルを含む96テストに必要な試薬が含まれています。
メソッドの原理
リアルタイムPCRは、反応の進行に伴って増加するレポーター分子によって産生される蛍光の検出に基づく。レポーター分子は、病原体DNAの標的領域に特異的に結合する二重標識DNAプローブである。蛍光シグナルは、増幅中にTaq DNAポリメラーゼのエキソヌクレアーゼ活性によって蛍光色素とクエンチャーが分離されることで増加する。PCRはDNAの温度変性、プライマーのアニーリング、相補鎖の合成というサイクルを繰り返す。
閾値サイクル値(Ct)は、反応内で発生する蛍光が閾値を超え、蛍光シグナルがバックグラウンドより有意に上昇するサイクル数である。
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