MOLgen Genetics Haemostatic Disease (F2/F5)試薬キットは、融解曲線の検出を伴うリアルタイムPCRによる凝固系および葉酸サイクルの一塩基多型の鑑別判定を目的としています。キットにはリアルタイムPCR用の試薬のみが含まれています。
はじめに
"Molgen Genetics Haemostatic Disease (F2/F5) Kit "は、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(PCR)によるF2遺伝子(凝固第Ⅱ因子、プロトロンビン)の多型20210 G/AおよびF5遺伝子(凝固第Ⅴ因子、プロアクレリン)の多型1691 G/A(ライデン突然変異)の差次判定を目的とし、蛍光タグを用いたハイブリダイゼーション産物の融解および融解曲線の検出を行います。
本キットは、Adaltis AmpliLabのようなブロック型PCRサイクラーCFX96(Bio-Rad社、米国)での使用を想定している。
本アッセイキットは、血液凝固系障害のリスクを増大させる遺伝的要因の包括的な研究のために臨床に応用することができる。
臨床サンプル(頬上皮、全血)からのヒトDNAの抽出は、キット "MOLgen Universal Extraction Kit "を用いて行う。
このキットはコントロールサンプルを含む48サンプルの分析用に設計されています。
方法の原理
本法の原理は、選択したヒトDNA領域の増幅に基づき、PCR産物と特異的プローブのハイブリッド複合体の融解曲線を検出します。増幅のプロセスは、DNAマトリックスの温度変性、DNAマトリックスの相補的配列とプライマーのアニーリング、Taqポリメラーゼによるこれらのプライマーからの相補鎖の合成というサイクルの繰り返しで構成される。
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