本試薬キットは、融解曲線の検出を伴うリアルタイムPCRによる凝固系および葉酸サイクルの一塩基多型の鑑別判定を目的としています。キットにはリアルタイムPCR用の試薬のみが含まれています。
はじめに
"Molgen Genetics Haemostatic Disease (MTR/MTRR/MTHFR) Kit "は、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応(PCR)と蛍光タグを用いたハイブリダイゼーション産物の融解および融解曲線の検出により、ヒト葉酸サイクルの遺伝子における4つの一塩基多型(MTR:2756 A/G; MTRR:66 A/G; MTHFR:677 С/T および MTHFR:1298 А/C)の差異判定を行うためのキットです。
本キットは、Adaltis AmpliLabなどのブロック型PCRサイクラーCFX96(Bio-Rad社、米国)での使用を想定しています。
本アッセイキットは、葉酸サイクル異常のリスクを増大させる遺伝的要因の包括的研究のために、臨床現場で応用することができる。
臨床サンプル(頬上皮、全血)からのヒトDNAの抽出は、キット "MOLgen Universal Extraction Kit "を用いて行う。
このキットは、コントロール検体を含む48検体の分析用に設計されています。
方法の原理
本法の原理は、選択したヒトDNA領域の増幅に基づき、PCR産物と特異的プローブのハイブリッド複合体の融解曲線を検出します。増幅のプロセスは、DNAマトリックスの温度変性、DNAマトリックスの相補的配列とプライマーのアニーリング、Taqポリメラーゼによるこれらのプライマーからの相補鎖の合成というサイクルの繰り返しで構成される。
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