Opal™は、1つの画像内で最大6つの組織バイオマーカーと核カウンターステインを同時に検出する実用的なワークフローです。このメソッドは標準的な免疫組織化学と類似しており、標準的なIHCメソッド開発が行われている多くのラボで利用可能です。スタンドアロンのOpal Fluorophore試薬パックは、パネルのバイオマーカー量とデザインを自由に選択できます。
Opal 780試薬パックは2液反応であり、Phenoptics 2.0 7色ホールスライドワークフローの一部です。試薬パックには以下が含まれます:
Opal TSA-DIG, 1バイアル
Opal Polaris 780、1バイアル
ジメチルスルホキシド(DMSO)、1 x 100 uL
一次抗体やその他のワークフロー試薬は別途お求めください。パックには最大50枚のスライドを染色するのに十分な試薬が含まれています。通常、1スライドあたり100~300μLのOpal Working Solutionが必要です。
Opal TSA-DIG の再構成と希釈のプロトコール:
オパール TSA-DIG 試薬を 75μL の DMSO に溶解します。
各プロシージャーの前に、手動染色の場合は 1X Plus Amplification Diluent で、自動染色の場合は 1X Plus Automation Amplification Diluent で希釈し、Opal TSA-DIG Working Solution を作成します。推奨希釈倍率は1:100です。
オパール780の再構成と希釈のプロトコール
オパール 780 試薬を 300 uL の ddH2O に溶解します。
各処置の前に、オパール 780 をブロッキング/Ab 希釈液で希釈し、オパール 780 ワーキング溶液を調製します。推奨希釈比は 1:25 です。
オパール試薬パックは、単複両方の組織染色に使用でき、PhenoImager HT(旧Vectra® Polaris™)定量病理イメージングシステムでのイメージング用に設定および検証されています。
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