血清中のアラニンアミノトランスフェラーゼの定量用。
方法
国際臨床化学連合(IFCC)は、1980年にLDH-NADH結合測定法を利用した推奨法案を発表した。 ここに記載された手順はその方法に基づいている。
原理
ALTはL-アラニンから-ケトグルタル酸へのアミノ基の転移を触媒し、ピルビン酸とL-グルタミン酸を生成する。 乳酸デヒドロゲナーゼは、ピルビン酸の還元と同時にNADHのNADへの酸化を触媒する。 その結果、吸光度の減少率はALT活性に正比例する。
試薬調製
R1 試薬 4 部と R2 試薬 1 部を混合し、作業試薬を調製する。
(例:200 µL R1 と 50 µL R2 試薬)。
試薬の劣化
以下の場合は試薬を使用しないでください:
1.340nmの吸光度が0.8未満の場合。
2.試薬の性能パラメータを満たしていない。
注意事項
1.この試薬セットは体外診断用です。
2.R1試薬には保存料としてアジ化ナトリウムが含まれています。 摂取しないでください。
検体の採取と保管
1.溶血していない血清を推奨する。赤血球にはALTが含まれているため、結果が誤って高くなることがあります。
2.血清中のALTは室温(15~30℃)で3日間、4℃で1週間安定です。
手順
波長:340nm
アッセイタイプ:キネティック
反応方向:減少
温度:37
光路:1cm
1.室温に戻す ( 15 -30 °C)
2.蒸留水で光度計を0(ゼロ)にする。
3.混合し、37℃でインキュベートする。
4.60秒後、吸光度を読み取り記録する。
5.チューブを37℃に戻す。
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