本製品は、ゲノム DNA 除去と cDNA 合成をワンステップ操作で同時に行うことができ、サンプルのコンタミネーションや複雑な添加による RNA 劣化のリスクを効果的に回避することができる、ゲノム除去および逆転写用のワンチューブ マスターミックスです。本製品には非常に強力なRScript II逆転写酵素が含まれており、ごく少量のtotal RNAまたはpoly(A) mRNAから第一鎖cDNAを合成するため、GC含量が高く複雑な構造を持つRNAテンプレートの逆転写に適している。この酵素は熱安定性が大幅に向上しており、65℃までの反応温度に耐えることができ、合成されたcDNAの収率も高い。熱に弱いdsDNaseを加えることで、残存ゲノムDNAを室温でサンプルから除去することができる。 50℃での不活性化はcDNAに影響を与えない。最適化された5×RScript II All-in-One RT Bufferには、ゲノム消化およびcDNA合成に適合するRandom PrimerおよびOligo18 (dT)があらかじめ混合されている。逆転写物は、その後の遺伝子発現解析のための色素およびプローブqPCRと互換性があります。
RK003-0050の逆転写性能
100ng、10ng、1ngのHela細胞RNAを鋳型として、RK003-0050を逆転写反応後にqPCRを行い、2つの競合品と比較した。増幅曲線は、特に低テンプレート濃度において、競合他社を凌ぐ優れた性能を示した。
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