Bisulfite Sequencing Library Prep Kit(illuminaプラットフォーム)は、バイサルファイト処理したDNA(50 ng~500 ng)をインプットとしてNGSライブラリーを構築するために開発された。DNAメチル化は、プロモーターやエンハンサーへの転写因子のアクセスを阻害することにより、遺伝子制御やゲノムインプリンティングにおいて重要な役割を果たすことが知られているエピジェネティックなメカニズムである。重亜硫酸塩シーケンシングは、重亜硫酸ナトリウム処理下でのCからTへの変換に基づく、生物医学研究における一般的な技術である。
近年、NGSは全ゲノムレベルのDNAメチル化状態を1塩基分解能で同定する強力なツールとなった。しかし、NGSライブラリーの重亜硫酸塩処理は、ライブラリーに多大なダメージを与えることがよく知られている。
通常のバイサルファイトSEQライブラリー調製(バイサルファイト変換前のライブラリー調製)の場合、DNA剪断装置と高価なメチル化アダプターが必要となる。さらに、その後のバイサルファイト変換により、構築されたライブラリーに多大なDNA損傷が生じる。
BioDynami社は、この問題を解決するために独自のライブラリー前処理技術を開発した。この技術では、バイサルファイト処理したDNAをインプットとして使用することで、バイサルファイト変換によるライブラリーの著しい損失を回避している。さらに、DNAシアリングステップや高価なメチル化アダプターも必要ありません。キットのDNAポリメラーゼは、高忠実度の増幅能とウラシル耐性を持ち、バイサルファイトシーケンスライブラリーの増幅に最適です。最終ライブラリーは鎖特異的である。
キットの利点
簡単で迅速なプロトコール
簡単:ハンズオン時間はわずか10分
クイック:プロトコルの総時間は約1.5時間
シンプルなワークフロー:少ないステップ
指向性ライブラリー
---