Bioneer の AccuRapid™ Cloning Kit は、PCR で増幅されたインサートの両端と、その相補配列をリニアライズベクターの 18~21 bp の末端に認識させ、それらを接続することにより、1~3 個のインサート(PCR 産物)を正確かつ迅速にリニアライズベクターにクローニングします。制限酵素処理後にライゲーション法を用いる従来の方法とは異なり、クローニングしたいインサートをPCRにより迅速に、かつ正確に目的の位置に配置することができます(ランプ速度9.5℃/秒の世界最速のPCR装置AllInOneCycler™を使用することにより、増幅をより速く行うことができます。)
本製品はドライアイスで出荷されます。
特長とメリット
高速・高精度なクローニング
30分反応によるクローニング
簡便なプロトコール
ベクターの両端18~21bpに相補的な配列を含むプライマーを使用し、制限酵素処理なしでインサートを増幅し、目的の方向にクローニングする。
同時クローニング
1~3個のインサート断片を、それぞれの断片の両端相補配列を用いて、目的の配列で同時にクローニングする。
ユーザーフレンドリーなカスタマイズ
クローニング設計のカスタマイズが容易で、希望する形状のベクターを実現できます。
実験方法
1リニアライズドベクターの作製
AccuRapid ™ Cloning Kitを使用する前に、PCRや制限酵素を使用してベクターを完全に直線化することが重要である。
直鎖化したベクターは、クローニング効率が高く、インサートを含まない円形ベクターのコロニーを作る可能性が低く、インサートを含むコロニーを増やすことができます。
* クローニング効率を上げるために、次のステップに進む前に電気泳動でベクターが直鎖化されているかどうかを確認することをお勧めします。
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