末梢血中の単核球(リンパ球および単球)の密度は1.075~1.090g/mlであり、赤血球、多核白血球および血小板の密度とは異なる。赤血球と顆粒球の密度は比較的大きく(約1.092g/ml)、血小板の密度は1.030~1.035g/mlの間です。したがって、ヒトリンパ球分離培地はある程度の密度勾配を生成するために使用され、希釈された全血はスムーズに分離培地上に舗装されます。遠心分離後、赤血球と顆粒球は密度が大きいためチューブの底に沈みます。それらの密度は分離培地の密度以下であるため、リンパ球と単球は分離培地の表面に見られます。また、分離培地中には少量の細胞が浮遊していることもある。分離培地表面の細胞を吸引することで、末梢血から単核球を分離することができます。
本シリーズは、迅速かつ簡便に使用でき、細胞毒性がなく、細胞収量が高く、活力があるなどの利点があります。
トラブルシューティング
最適分離温度は(20±5)℃ですが、これを超えると分離効果に影響が出ます。分離メデュームを室温(20±5℃)に温め、軽く振ってからご使用ください。冷蔵庫からの直接の使用は避けて下さい。
分離培地について、抗凝固血液の希釈に使用する等張培地(PBSまたは0.9%NaCl)は無菌のものを使用し、RPMI-1640培地で代用できます。
血液を1:1に希釈すると、赤血球の凝固を抑え、リンパ球の採取量を増やすことができる。
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