LAL検査は、グラム陰性菌のエンドトキシンがプロ酵素の活性化を触媒する事実に基づいている。活性化の初期速度は、存在するエンドトキシンの濃度によって決定される。活性化された酵素(コアグラーゼ)は、LAL中に存在する凝固タンパク質(コアグローゲン)内の特定の結合を加水分解する。加水分解されたコアグリンは自己会合し、ゼラチン状の血栓を形成する。エンドトキシンを検出するためのLALの使用は、Limulus polyphemusのグラム陰性感染症が致命的な血管内凝固を引き起こしたという観察から発展してきた。
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