適切で正確、かつ信頼性の高いqPCR結果を得るために、qPCR実験では常に慎重に選択したコントロールを含める必要があります!
NTC(テンプレートコントロールなし) > NTC(テンプレートコントロールなし
> qRT-PCR 実験における RT 酵素コントロールなし
> 遺伝子発現研究の文脈で実験プロトコルで安定した内因性コントロール(ハウスキーピングコントロール)>。
> 診断用PCRの陽性コントロール。IPC (RT-IPCY-xxxx) & SPC (RT-SPCY-xxxx) コントロールをご参照ください。
Universal Exogenous qPCR positive Control for Qualitative validation (IPC & SPC)をご覧ください:
リアルタイムPCRアッセイは、多くのサンプル(臨床、土壌、植物など)に含まれる様々な物質によって阻害される可能性があります。また、核酸の分離に使用した試薬のキャリーオーバーも増幅反応を阻害することがある。その他、ターゲット核酸の分解、サンプルの処理ミス、サーモサイクラーの誤作動なども偽陰性の原因となります。Eurogentec の Universal Exogenous qPCR positive Control は、核酸増幅アッセイにおけるすべてのステップの完全性を正確に評価する方法を提供します:
> 真のターゲットネガティブと偽ネガティブを区別する。
> 抽出中のターゲットの損失や劣化をモニターする。
> 核酸抽出物の品質評価
定量的正規化のための参照遺伝子に基づくコントロール(ハウスキーピングコントロール):
当社のqPCRハウスキーピングコントロールキットは、低発現レベルから高発現レベルまで、すべての相対発現範囲をカバーしています。各セットは機能的に検証され、Eurogentec qPCR MasterMixesおよびコアキットと組み合わせた場合のPCR効率が95~100 %になるように最適化されています。
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