2-D Quant Kitは、2次元電気泳動、SDS-PAGE、IEFなどの電気泳動技術用に調製されたサンプル中のタンパク質濃度を正確に測定するために設計されています。
概要
2-D Quant Kitは、2次元電気泳動、SDS-PAGE、IEFなどの電気泳動技術用に調製されたサンプル中のタンパク質濃度を正確に測定するために設計されています。
2%SDS、1%DTT、8M尿素、2Mチオ尿素、4%CHAPS、2%Pharmalyte、2%IPG Bufferの存在下でタンパク質濃度を正確に測定します。
妨害物質を残しながらタンパク質を定量的に沈殿させる。
0~50μgタンパク質の範囲で直線的に反応し、推奨サンプル量は1~50μl。
タンパク質を定量する一般的な分光光度法は、クマシー色素の結合またはタンパク質触媒による銅(Cu2+)イオンの亜銅(Cu+)イオンへの還元に依存しています。色素結合アッセイは、色素と結合する試薬の存在下では使用できません。これには、プラスワンCHAPS、SDS、Triton X-100のような担体両性溶媒や洗剤が含まれます。
銅イオンの還元に依存するアッセイは、DTTのような還元剤の存在下、またはチオ尿素やEDTAのような銅イオンと錯体を形成する試薬の存在下では使用できません。
2-D Quant Kitの手順は、妨害物質を残したままタンパク質を定量的に沈殿させることで機能します。アッセイは、タンパク質への銅イオンの特異的結合に基づいています。沈殿したタンパク質は銅を含む溶液に再懸濁され、未結合の銅は比色剤で測定されます。480nmの吸光度はタンパク質濃度に反比例する。
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