RNaseの抑制剤は(ネズミ科)エシェリヒア属大腸菌の溶ける形態に組換えのネズミ科の源のRNaseの抑制剤表現したである。それはRNases (RNase A、BのC)の広い範囲を禁じることができる。それはRT-PCR、RTqPCRによってテストされ、さまざまな逆のtranscriptaseおよびDNAポリメラーゼと互換性がある。人間の源のRNaseの抑制剤と比較されて、ネズミ科の源のRNaseの抑制剤は人間蛋白質の非常に酸化に敏感なシステインの2つを含んでいない、従ってより高い酸化防止活動があり、qPCRのような高いDTTの感受性の実験のためにより適している。
単位定義
5 NGのRNaseの50%を禁じるために必要な酵素の量は活動(u)の1つの単位と活動定義された。RNase Aの活動は加水分解の2"で量的に、3" - 3'を発生させるCMP - CMP得られる。
品質管理
Exonucleaseの残余の検出:λ後部のIIIのこのプロダクトそして0.6のμgの200 Uは16 hのための37°Cで孵化し、DNAバンドは電気泳動の後で変わらなかった。
endonucleaseの残余の検出:Supercoiled pBR322 DNAのこのプロダクトそして0.6のμgの200 Uは4 hのための37°Cで孵化し、DNAバンドは電気泳動の後で変わらなかった。
E.coli DNAの残余の検出:このプロダクトの200 Uの核酸の残余はエシェリヒア属大腸菌gDNA特定のTaqManのqPCRによって検出され、エシェリヒア属大腸菌のゲノムの残余は10枚のコピーよりより少しだった。
適用
1. cDNAの最初の繊維の統合
2. Polysomeの分離
3. 生体外のトランスクリプション
4. 細胞翻訳システム無し生体外で
注意を必要とする問題
1. RNaseの活動はpH 7 | 8.の最高の活動の水素イオン濃度指数の広い範囲によって、禁じられた。
2. (渦、等)は泡立つによりまたは活発な動揺不活性化を引き起こすことができる。
3. RNase Hの活動は禁じられない。