逆転写酵素試薬 R3002

酵素アガロースゲル核酸

金の逆TranscriptaseはM-MLV （RNase H-）の逆Transcriptaseに基づいて生体外の分子進化によって得られる新しい逆のtranscriptaseである。cDNAの最初の繊維は37~55°C.金の逆Transcriptaseで複雑な二次構造が付いているRNAの型板の逆のトランスクリプションのために非常に適しているかなり改善された感受性、特定性、熱安定性および半減期を促進することを持っている総合することができる。金の逆Transcriptaseに長いcDNAの統合および実物大のcDNAの図書館の高い比率の構造に使用することができるより強い重合および延長能力がある。 単位定義 多（RA）·Oligo （dT）型板/プライマーとして使用された。10分の37°Cで、acid-insoluble物質として1つのnmolのdTTPを加えるために必要な酵素の量は活動（u）の1つの単位と定義された。 品質管理 Exonucleaseの残余の検出:200 Uこのプロダクトのおよび50 pmol single-stranded DNAの基質は16 hのための37°Cで孵化し、DNAの電気泳動バンドは変性のページの電気泳動の後で変わらなかった。 endonucleaseの残余の検出:pBR322 DNAのこのプロダクトそして0.3のμgの200 Uは4 hのための37°Cで孵化し、プラスミッドの電気泳動バンドはアガロースのゲルの電気泳動によって変わらなかった。 RNaseの残余の検出:200のUのプロダクトおよび293個の細胞のRNAの1つのμgは30分の37°Cで孵化し、RNAの電気泳動バンドはアガロースのゲルの電気泳動によって不変だった。 E.coli DNAの残余の検出:60 Uの核酸の残余はエシェリヒア属大腸菌gDNA特定のTaqManのqPCRによって検出され、エシェリヒア属大腸菌のゲノムの残余は10枚のコピーよりより少しだった。 機能検出1: 200のUの酵素は逆のトランスクリプション システムに加えられた、1 μgのヒーラ細胞の総RNAは型板、プライマーとしてOligo （dT） 23として使用され、反作用はVINの遺伝子のPCRの拡大のために45 min.1/10 cDNAプロダクトのための50°Cで取られた行なわれた。EBの汚損のアガロースのゲルの電気泳動は単一の4.6 kbバンドを示した。