Dongsheng M-MLVの逆Transcriptase (RT)は遺伝的に変更されたM-MLV RTである。それは構造および触媒作用の特性によってM-MLV RTと異なる。酵素はRNA依存した、DNA依存したポリメラーゼの活動およびRNA-DNAの雑種のRNAに特定のリボヌクレアーゼHの活動を所有している。Dongsheng M-MLVの逆Transcriptaseに鳥類のMyeloblastosisのウイルス(AMV)の逆のtranscriptaseよりかなり低いRNase Hの活動がある。
源
Moloneyのネズミ科の白血病のウイルスの逆のtranscriptaseを符号化するポールの遺伝子のクローンとして作られた片が付いているE.coliの細胞。
適用
使用のための最初繊維のcDNAの生成:
- PCRは最初の繊維のcDNAの統合については、議定書を見る;
-実時間PCR;
-第2繊維のcDNAの統合;
DNAの分類;
プライマー延長によるRNAの分析。
品質管理
適切な質テストによって確認されるendodeoxyribonucleases、exodeoxyribonucleases、ホスファターゼおよびリボヌクレアーゼの不在。
機能的には最初繊維のcDNAの統合でテストされて。
店の緩衝
20m M Tris HCl (pH 7.5)
NaCl 200のmMの
0.1 mMのエチレンジアミン四酢酸
1つのmM DTT
0.01% NP-40
50%のグリセロール
5xFirst繊維の緩衝
250のmM Tris HCl (25°C)のpH 8.3
KCl 375のmMの
MgCl2 15のmMの