virellaSARS-CoV-2変異株リアルタイムRT-PCRキットは、新型コロナウイルス(SARS-CoV-2)の系統B.1.1.7(英国、UK)、B.1.351(南アフリカ、ZA)およびP.1(ブラジリア、BRA)を生物学的検体から同時に鑑別するためのアッセイです。
2 検査の原理
virellaSARS-CoV-2変異リアルタイムRT-PCRキットには、SARS-CoV-2スパイクタンパク質の変異を検出するための4つの特異的なプライマーとプローブシステムが含まれている。各変異は1つの特定の色素に関連しています。いずれかの変異が存在する場合、特定のチャンネルはシグナルを示さないか、遅延したシグナルを示します。このアッセイでカバーされる変異は、del69/70 (FAM)、del 241-243 (ROX)、N501Y (HEX)、H655Y (Cy5)である。B.1.1.7(UK)、B.1.351(ZA)、P.1(BRA)の場合、HEXチャンネルと、変異に応じて追加された1つのチャンネルは、シグナルを示さないか、遅延したシグナルを示す(表7)。この場合、他の2つのチャンネルは正常な信号を示すはずである。
4 ユーザーが用意する装置と試薬
- 滅菌済みマイクロチューブ
- ピペット(容量調節可能)
- 滅菌済みフィルター付きピペットチップ
- テーブル遠心分離機
- ボルテキサー
- リアルタイムPCR装置
- 光学PCR反応管(蓋付き)または光学PCR反応プレート(光学ホイル付き
- オプション自動化用リキッドハンドリングシステム
7 試料
virellaSARS-CoV-2変異体リアルタイムRT-PCRキットの出発試料は、リアルタイムRT-PCRでSARS-CoV-2陽性と判定されたRNAです。CT値が32を超える非常に低いコピー数の溶出液は、virellaSARS-CoV-2 mutantリアルタイムRT-PCRでの検査には適していません。
8 サンプル調製
溶出した RNA は、変異検出の条件を最適化するため、希釈バッファーで 1:10 に希釈する必要がある。
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