この検査法は、もともと血清および尿中のクレアチニンを評価するために考案された酵素法を改良したものである。検査は2段階で行われる。最初のステップでは、クレアチナーゼでサンプルをプレインキュベートする最初の数分間でクレアチンが除去されます。第二段階では、クレアチニナーゼの添加が反応のスターターとして作用し、サルコシンオキシダーゼ(Sar OD)の存在下で試料のクレアチニンを加水分解し、過酸化水素を生成します。
クレアチニン + H2O クレアチン
サルコシン + H2O + O2 H2O2 + グリシン + HCHO
オキシダーゼ反応から生成した過酸化水素は、発色誘導体HTIBと4-アミノアンチピリン(4-AA)がペルオキシダーゼ(POD)の存在下で縮合し、赤色のキノンイミン色素を形成するトリンダー型反応によって定量される。
4-AA + HTIB 赤色キノンイミン + H2O
発色速度は試料中のクレアチニン濃度に比例する。
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