NZYSupreme Mutagenesis キットは、DNA 配列中の単一または複数のヌクレオチドに点変異を生じさせ、欠失または挿入するように設計されている。このシステムには、目的の変異を含む2つの合成オリゴヌクレオチドプライマーが必要である。
詳細
NZYSupreme Mutagenesis kitは、PCR法を用いて、あらゆる種類のプラスミドDNAに点変異を生じさせたり、単一または複数のヌクレオチドを欠失させたり挿入したりする、簡便で非常に効率的な方法を提供する。この変異誘発キットは、作業時間を短縮し、DNA編集の効率を高めるために最近開発された。このシステムでは、目的の変異を含む2つの合成部分相補的オリゴヌクレオチドプライマーを用意する必要がある。これらの変異オリゴヌクレオチドプライマーを、高精度のポリメラーゼであるSupreme NZYProof DNAポリメラーゼに組み込むと、(合成DNAはメチル化されていないため)Dpn I消化に耐性のある、千鳥状のニックを含む変異プラスミドが生成される。Dpn I処理後、得られた変異プラスミドはNZYStarコンピテント細胞の形質転換によって回収される。変異導入プロトコルの概略は図1を参照。JM101やSCS110を含むダム大腸菌株から単離したDNAは、変異誘発反応の鋳型には適さない。
構成要素
- Supreme NZYProof 2x 無色マスターミックス
- Dpn I (10 U/µL)
- コントロールプラスミド
- 変異導入コントロールプライマーミックス
- コンピテントセル コントロールプラスミド (0.1 ng/µL) (*)
(*) MB44702キットにのみ含まれています。
詳細情報
出荷条件
ドライアイス
用途
部位特異的突然変異誘発
特徴
15kb以下のプラスミドの変異誘発;高速
製品カテゴリー
DNAクローニング & 変異導入
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