NZYGigaprepキットを使用すると、大腸菌株から高純度のプラスミドDNAを迅速に大量調製することができます。
詳細
NZYGigaprepキットは、高純度プラスミドDNAを迅速かつ大量に調製するために設計されています。本キットは、高コピー数のプラスミドからは通常2~10ミリグラムのDNAを、低コピー数のプラスミドからは500マイクログラム~2ミリグラムの核酸を、すべて組換え大腸菌株から得られるように最適化されています。当社のキットは、改良されたアルカリ/SDS溶解手順でプロセスを合理化する。この手順は、プラスミド精製のために細菌細胞ペレットをプライミングする。アルカリ性条件下で染色体DNAとプラスミドDNAの両方を変性させる。次に、酢酸カリウムを導入すると、染色体DNAと他の細胞成分を含む沈殿物の形成が始まる。同時に、酢酸カリウムバッファーが溶解液を中和し、プラスミドDNAが本来のスーパーコイル状態に戻り、溶液中に維持される。平衡化バッファーでカラムを平衡化すると、プラスミドDNAは陰イオン交換樹脂に選択的に結合する。カラムを十分に洗浄することで、プラスミドDNAは効率的に精製され、溶出の準備が整います。簡単な沈殿工程により、溶出したDNAを回収することができ、その後TEバッファーに容易に溶解して使用することができる。精製されたDNAは、トランスフェクション、in vitro転写、自動蛍光または手動シーケンス、クローニング、PCR、ハイブリダイゼーションなど、最も要求の厳しい分子生物学的アプリケーションに適しています。低コピー数のプラスミド、BAC、コスミドからDNAを分離するには、Buffer M1、M2、M3の容量を2倍にしてください。
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