スピンミニカラムを使用して、最大5mLの細菌培養物から低エンドトキシン(<1EU/µg)のプラスミドDNAを分離する
概要
従来の精製方法で分離されたプラスミドは、通常、高レベルのエンドトキシン(リポポリサッカライドまたはLPSとしても知られている)を含んでおり、下流のトランスフェクション実験に大きな影響を与える可能性があります。高コピー数のプラスミドには最大5 mL、低コピー数のプラスミドには最大10 mLのオーバーナイト培養液を使用することができます。
E.Z.N.A.® Endo-Free Plasmid Mini Kit Iは、プラスミド精製手順に効率的なエンドトキシン除去ステップを統合し、効率的なトランスフェクションのための高品質のトランスフェクショングレード(< 0.1 EU/μg)プラスミドを生産します。細菌細胞は、アルカリ-SDS溶解法を用いて溶解されます。クリアした細胞溶解液をETR試薬で処理し、エンドトキシンを効率よく除去します。結合条件を調整した後、細胞溶解液をHiBind® DNAカラムにアプライし、精製したDNAをカラム膜から溶出させます。
迅速性 - 30分以内
安全性 - フェノール/クロロホルム抽出は不要です。
多用途 - スピン、バキューム方式を選択可能
高品質 - エンドトキシンを効率的に低減(<0.1 EU/µg)
仕様
特徴 - 仕様
下流用途 - 高感度細胞株トランスフェクション、遺伝子治療など。
出発材料 - OD600が2~3である1~5mLのLB培養液、または同等のもの
プラスミドタイプ - ハイコピー、ローコピー、コスミドDNA
処理モード - 手動、遠心分離
スループット - 1 - 24
DNA結合技術 - Silica mini spin column
ライセートクリアリング方法 - 遠心分離法
処理時間 - <30分
収量 - 高いコピー数で15~25 µg、低いコピー数で0.1~5 µg
その他 - エンドトキシン除去工程を含む
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