このHTRFキットは、cGAS-STING経路の活性化の読み出しとして、マウスリン酸化STINGの細胞ベースの定量的検出を可能にする。
オーバービュー
このHTRFセルベースアッセイは、Ser365でリン酸化されたマウスSTINGを簡便かつ正確に定量します。病原体感染およびdsDNAの細胞質センサーcGASへの結合後、STINGタンパク質はTBK1によってリン酸化される。これによってIRF3との結合が可能になり、IFN1型の産生と他の免疫応答が誘導される。STING経路はその後、オートファジーを伴うSTING分解によってスイッチオフされる。
その他の仕様
ユニットサイズ 500アッセイポイント
仕組み
マウス Phospho-STING (Ser365) 測定原理
Mouse Phospho-STING (Ser365) assayは、Ser365でリン酸化されたマウスSTINGを測定します。ウエスタンブロットとは異なり、このアッセイは完全にプレートベースであり、ゲル、電気泳動、トランスファーを必要としません。Mouse Phospho-STING (Ser365) assay は2つの標識抗体を使用します:1つはドナー蛍光色素、もう1つはアクセプター蛍光色素です。1番目の抗体は、タンパク質上のリン酸化モチーフに特異的に結合するもので、2番目の抗体は、リン酸化状態とは無関係にタンパク質を認識する能力で選択される。タンパク質のリン酸化は、2つの標識抗体を含む免疫複合体の形成を可能にする。これによりドナーの蛍光色素がアクセプターに近接し、FRETシグナルが発生する。FRETシグナルの強度は、サンプル中に存在するリン酸化タンパク質の濃度に正比例し、洗浄不要のアッセイフォーマットでタンパク質のリン酸化状態を評価する手段を提供する。
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