このHTRFキットは細胞性STAT6を検出し、JAK/STATシグナル伝達を最適に読み取るために、当社のphospho-STAT6キットと併用し、標準化アッセイとして使用することができます。
オーバービュー
Total STAT6 セルラーアッセイキットは、リン酸化、非リン酸化を問わず、STAT6の発現レベルをモニターするようにデザインされています。当社のPhospho-STAT6キットと互換性があり、JAK/STATシグナル伝達経路をより正確に読み取るために、1サンプルからリン酸化および全タンパク質を分析することができます。
仕様
その他の仕様
ユニットサイズ 500アッセイポイント
仕組み
トータルSTAT6アッセイ原理
Total STAT6アッセイは、細胞溶解液中のSTAT6の発現レベルを定量します。ウエスタンブロットとは異なり、このアッセイは完全にプレートベースであり、ゲル、電気泳動、トランスファーを必要としません。Total-STAT6アッセイでは、2つの標識抗体を使用する:1つはドナー蛍光色素に結合し、もう1つはアクセプターに結合する。両抗体は、タンパク質上の明確なエピトープに対して高度に特異的である。細胞抽出液中にSTAT6が存在する場合、これらの結合体の添加によりドナー蛍光体がアクセプターに近接し、FRETシグナルが発生する。その強度はサンプル中のタンパク質濃度に正比例し、洗浄不要のアッセイフォーマットでタンパク質の発現を評価する手段を提供する。
Total STAT6 2プレートアッセイプロトコール
2プレート・プロトコールでは、溶解前に96ウェルプレートで細胞を培養し、Total-STAT6 HTRF検出試薬を添加する前に溶解液を384ウェル低容量検出プレートに移します。このプロトコールにより、細胞の生存率とコンフルエンスをモニターすることができる。
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