溶液試薬キット 63 series

リアルタイムPCR用核酸リン酸塩

mRNA 発現レベルの測定は、ノーザン分析、リボヌクレアーゼ保護、またはリアルタ イム定量 PCR のいずれであっても、通常、内部または内因性の参照遺伝子で得られたデー タと比較することによって標準化される。β-アクチンやグリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ（GAPDH）のようなハウスキーピング遺伝子は、異なる処理条件下でも発現レベルが一定に保たれると予想されるため、最も頻繁に使用される。残念ながら、この仮定は常に有効とは限らず、ハウスキーピング遺伝子のみに基づいた結果は偏る可能性がある（Suzuki, Higgins, and Crawford 2000）。より良い方法は、ヒト組織由来の唯一のcDNAコントロールである当社のqPCR Human Reference cDNAを用いてデータを正規化することです。 qPCR Human Reference cDNAは、異なる定量PCR（qPCR）実験のデータを比較するための理想的なコントロールです。複数の異なる組織から収集されたトータルRNAプールから調製されているため、qPCR Human Reference cDNAは、RNA出発物質のマイクロアレイ解析によって示されるように、幅広い遺伝子カバレッジを提供します。全組織から調製されたRNA、したがってcDNAは、細胞株から調製されたRNAよりもばらつきが少なく、より優れた遺伝子発現を提供する（データは示さず）。さらに、PCR分析から、我々の全RNAにはゲノムDNAがほとんど含まれていないことがわかった。これにより、転写物のコピー数をより正確に測定することができる。高存在遺伝子と低存在遺伝子の両方が十分に網羅されているため、各qPCRアッセイ用に連続希釈した標準品を幅広く調製することができる。RNAソースは工業的規模で調製されるため、リファレンスcDNAのロット間変動は最小です。