CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time), Ver.2は、細胞からリアルタイムPCRで解析可能なcDNAを得ることができます。微量の核酸を扱う従来の技術では、精製工程での産物の損失がしばしば問題となります。しかし、このcells-to-cDNAキットでは、RNAやcDNAの精製工程でロスが生じることがないため、良好な産物収量を確保することができます。
手順としては、まず細胞を溶解し、次にdTアダプタープライマー(RT dT Primer 2)を用いて逆転写反応を行い、mRNAからcDNAを合成する。次に、ターミナルデオキシヌクレオチジルトランスフェラーゼ(TdT)を用いて、合成されたcDNAにdAテールを付加する。得られた3'dAテール含有cDNA産物はPCRの直接鋳型として使用され、必要な増幅サイクルが少なくなる。
細胞からcDNAへの移行に加えて、この産物は微量のRNAからcDNAを増幅するために使用することができる。
CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time), Ver.2は、エキソヌクレアーゼI処理工程を追加することで、非特異的なプライマー由来の増幅を抑制し、低発現遺伝子の収率を向上させます。
CellAmp Whole Transcriptome Amplification Kit (Real Time) Ver.2は、少数の細胞からcDNAを直接増幅することができます。増幅されたcDNAはリアルタイムPCRの鋳型として使用できます。微量の核酸を扱う従来の技術では、精製工程での核酸の損失がしばしば問題となる。しかし、このキットでは、RNAやcDNAの精製工程でロスを誘発する必要がないため、良好な収量が得られる。
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