ClonExpress®テクノロジーは、あらゆるベクターの任意の位置にインサートをクローニングすることができる、シンプルで高速かつ効率的なDNAシームレスクローニング技術である。任意の方法でベクターを直鎖化し、インサートに対してForward/Reverse PCRを行う。プライマーの5'端を直鎖化ベクターの末端配列に導入し、PCR産物の5'端と3'端が直鎖化ベクターの両端と同じ配列(15 bp-20 bp)になるようにする。配列のPCR産物と直鎖化ベクターを一定の割合で混合した後、リコンビナーゼの触媒作用のもと、37℃で30分間反応させれば、方向性のあるクローニングを完成させることができる。
新世代の組換えクローニングキットとして、ClonExpress® MultiSは特にマルチフラグメント組換え反応に最適化されており、一度に最大5つのインサートの逐次スプライシングクローニングを実現することができる。本キット独自のノンリガーゼシステムは、ベクターのセルフライゲーションによるバックグラウンドを大幅に軽減し、インサート自身が持つ酵素切断部位を考慮する必要がありません。高度に最適化された反応バッファと強化されたリコンビナーゼExnase MultiSは、クローンの組み換え効率を大幅に改善し、不純物に強いため、精製せずに直接直線化ベクターとインサートを使って組み換えクローニングが可能で、実験ステップが非常に簡略化されています。
製品の利点
マルチフラグメントスプライシングクローニングは、あらゆるベクターのほぼ全ての位置で行うことができる。
インサートが持つ制限部位を考慮する必要がない。
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