Ni Focurose FF(TED)は、Ni2+とタンパク質の側鎖にある特定のアミノ酸(主にヒスチジン、システイン、トリプトファン)との相互作用を利用した分離精製法です。Ni2+と相互作用するHisタグ付きタンパク質やその他の生体分子の精製に適している。Ni2+の強力なキレート特性により、真核生物の分泌系で発現するHisタグ付きタンパク質の精製に直接応用でき、サンプルの前処理を必要とせず、高レベルの還元剤やキレート剤に耐性があります。この樹脂は、ニッケル剥離なしで容易に洗浄・再生が可能で、直接NaOH洗浄ができる。
特徴
迅速かつシンプル(ワンステップ精製)
より高レベルの還元剤やキレート剤に耐性があり、真核生物の分泌系で発現したHisタグ付きタンパク質を前処理なしで直接適用でき、タンパク質の活性を最大限に維持できる。
ニッケル剥離の必要がなく、直接NaOH洗浄が可能なため、洗浄サイクルが大幅に短縮される。
従来のNi Focurose FF (IDA)やNi FocuroseFF (IMAC)と比較してニッケル溶出量が少なく、繰り返し再生する必要がない。
性能パラメーター
高架橋6%アガロース
粒子径範囲
45-165µm
平均粒子径(D50)
90±5µm
結合容量
≥10mg以上(Hisタグタンパク質)/mL(樹脂)
pH安定性
3-12(長期) 2-14(短期)
化学的安定性
0.01M HCl、0.01M NaOH(1週間)
20mM EDTA、10mM DTT、1M NaOH、8M 尿素、6M HCl グアニジン(24時間)
100mM EDTA、0.5Mイミダゾール(2時間)30%イソプロパノール(20分)
直線流速(0.3MPa)
≥300 cm/h 以上
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