Fast T4 DNA Ligaseは、NGSライブラリー構築の過程で、DNA断片とアダプターの接続に使用できる単一酵素の製品です。本製品はハイスループットなシーケンシングにより検証されており、優れた品質を有しています。本酵素は高効率なライゲーション能力を有しており、MGIプラットフォームのΩアダプターのような複雑な核酸断片のライゲーションに非常に適しています。システム調整を必要としないお客様には、Fast T4 DNA LigaseをコアコンポーネントとするHieff NGSTM Ultima DNA Ligation Module (Cat#12604)を選択されることをお勧めします。
単位の定義
20 μL のライゲーション反応系において、6 μg の λDNA-Hind Ⅲ を 16℃で 30 分間反応させたとき、DNA 断片が 50%以上ライゲーションするのに必要な酵素量を 1 unit (U) と定義した。
注意事項
1.T4 DNA Ligase は物理的な変性に敏感です。混合する際は、チューブを静かに倒立させ、よく振ってください。激しく振らないで下さい。
2.酵素は使用時にアイスボックスまたはアイスバス上で保存し、使用後は直ちに-20℃で保存してください。
3.本製品は研究用です。
4.安全と健康のため、白衣と使い捨て手袋を着用して操作してください。
使用方法
1.現在主流のDNAライブラリー構築キットは、末端修復・A-Tailing処理後の精製を行わず、直接アダプターライゲーションを行っているのが一般的です。反応系は、以下の準備を参考にしてください。十分にボルテックスした後、短時間スピンし、20℃で 15 分間インキュベートする。
2.使用するアダプターの品質や濃度は、ライゲーション効率やライブラリー収量に直接影響します。
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