LC/MSによる定量分析のためのDNAからの単一ヌクレオシドの迅速で簡単な生成手順
従来の6~16時間の多段階酵素消化に比べ、簡便な2時間の単一酵素消化
プロトコル
説明
Zymo Research 社の DNA Degradase Plus は、DNA を迅速かつ効率的に個々のヌクレオシド成分に分解するヌクレアーゼミックスです。ヌクレオシドにはマイナスに帯電したリン酸がないため、DNA Degradase Plus は LC/MS による全ゲノム DNA メチル化解析に理想的である。酵素による消化はワンステップの手順で行われ、他の利用可能な方法よりも迅速かつ簡便である。
技術仕様
アッセイ条件1X DNA Degradase Reaction Buffer中のDNA Degradase Plus。反応混合物を37℃で1時間以上インキュベートする。
濃度5 U/µl
酵素の不活性化70℃で20分間加熱して酵素を不活性化する。
単位の定義5 Uの酵素は、25 µlの反応容量で1 µgのゲノムDNAを37℃で1時間以上消化する。
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