Digestão de enzimas de restrição
Definição de unidade - Uma unidade é definida como a quantidade de enzima necessária para digerir 1 µg de fragmentos de ADN λ (digestão HindIII) em 1 hora a 37°C num volume total de reacção de 50 µl.
Condições de armazenamento - 10 mM Tris-HCl, 50 mM KCl, 1 mM DTT, 0,1 mM EDTA, 200 μg/ml BSA, 50% Glicerol, pH 7,4 @ 25°C
Condições de reacção - 1X Buffer CutS, Incubar a 37°C.
Tampão ou mistura de reacção - 1X Buffer CutS:
50 mM Acetato de potássio, 20 mM Tris-acetato, 10 mM Acetato de magnésio, 100 μg/ml BSA, pH 7,9 @ 25°C
Inactivação pelo calor - 65°C durante 20 min
Sensibilidade à metilação -
metilação dam - Não sensível
metilação dcm - Não sensível
Metilação CpG - Deficiente
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