O kit EIAgen Total T4 é um imunoensaio enzimático direto de fase sólida para a determinação quantitativa da tiroxina total (T4) no soro ou plasma humanos. O método pode ser utilizado para medir concentrações de T4 no intervalo de 4 a 300 ng/mL (0,4 a 30 µg/dL).
Introdução
A medição da concentração sérica de tiroxina é geralmente considerada como um importante teste de diagnóstico in vitro para avaliar a função tiroideia. Esta importância deu o impulso para a melhoria significativa da metodologia de ensaio que se registou nas últimas três décadas. Esta evolução processual pode ser rastreada desde o teste empírico de iodo ligado a proteínas (PBI) (1) até ao radioimunoensaio teoricamente sofisticado (2).
Esta metodologia de imunoensaio enzimático em microplacas proporciona ao técnico uma sensibilidade óptima, exigindo poucas manipulações técnicas.
Princípio do método
A amostra de soro ou plasma é pipetada para o poço revestido com estreptavidina. A adição do conjugado Biotina-T4 (Biotina-T4) e do iniciador de reação imunológica conjugado Anti-T4 -HRP inicia o ensaio competitivo. Durante a incubação imunológica, o T4 da amostra compete com o conjugado Biotina-T4 pelos locais de ligação anti-T4 do conjugado HRP Anti-T4 que, por sua vez, se liga aos poços revestidos com estreptavidina através da porção de biotina. Após a lavagem das espécies que não reagiram, a quantidade do complexo imunológico permaneceu ligada aos poços
Estreptavidina : Biotina-T4 : Anti-T4-HRP
é revelada pela incubação com o cromogénio/substrato. O desenvolvimento da cor azul é então interrompido com ácido sulfúrico,
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