o "Molgen DNA Helicobacter pylori S1 Kit" é um kit de ensaio para a deteção do ADN da Helicobacter pylori por PCR em tempo real.
Introdução
o "Molgen DNA Helicobacter pylori S1 Kit" foi concebido para detetar o ADN da Helicobacter pylori isolado de amostras clínicas utilizando o "Molgen Universal Extraction Kit". O ensaio baseia-se no método de reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real com deteção fluorescente do produto amplificado.
O kit contém os reagentes necessários para 48 testes, incluindo amostras de controlo.
O kit está validado para utilização com o iQ iCycler, iQ5 iCycler, CFX96 (Bio-Rad, EUA), DT-96 (DNA-Technology, Rússia) ou equivalente.
o "Molgen DNA Helicobacter pylori S1 Kit" foi concebido para a análise de materiais clínicos (amostras de tecido do estômago).
Princípio do método
A PCR em tempo real baseia-se na deteção da fluorescência, produzida por uma molécula repórter, que aumenta à medida que a reação prossegue. A molécula repórter é uma sonda de ADN com marcação dupla, que se liga especificamente à região alvo do ADN do agente patogénico. O sinal fluorescente aumenta devido à separação do corante fluorescente e do supressor pela atividade da exonuclease da Taq DNA-polimerase durante a amplificação. O processo de PCR consiste em ciclos repetidos: desnaturação do ADN à temperatura, recozimento do iniciador e síntese da cadeia complementar.
O valor do ciclo limiar - Ct - é o número de ciclos em que a fluorescência gerada numa reação ultrapassa o limiar de fluorescência, um sinal fluorescente que se eleva significativamente acima da fluorescência de fundo. O aumento do sinal de fluorescência deve-se à utilização de uma sonda de hibridação de ADN específica para uma determinada sequência de ADN que, no decurso da reação, se liga a uma das cadeias de ADN,
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