o "Molgen DNA Parvovirus B19 S1 Kit" é um kit de ensaio para a deteção do ADN do Parvovírus B19 pelo método de PCR em tempo real.
Introdução
o "Molgen DNA Parvovirus B19 S1 Kit" destina-se à deteção do ADN do Parvovírus B19 em amostras clínicas (soro sanguíneo, plasma, saliva) utilizando o método da reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real com deteção por fluorescência do produto amplificado.
A extração de ADN de amostras clínicas pode ser efectuada utilizando o "Molgen Universal Extraction Kit". Quando se utilizam kits de extração de ADN de outros fabricantes, recomenda-se vivamente a utilização de amostras de controlo interno (IC) fabricadas pela Adaltis.
Os resultados da análise PCR são tidos em conta em diagnósticos complexos de doenças.
O conjunto 1 destina-se a ser utilizado com cicladores de PCR de tipo bloco: AMPLIlab (Adaltis), iQ5 iCycler, CFX96 (Bio-Rad, EUA), DT-96 (DNA-Technology, Rússia).
O conjunto 1 contém os reagentes necessários para 96 testes, incluindo amostras de controlo.
Princípio do método
A PCR em tempo real baseia-se na deteção da fluorescência produzida por uma molécula repórter, que aumenta à medida que a reação prossegue. A molécula repórter é uma sonda de ADN com marcação dupla que se liga especificamente à região alvo do ADN do agente patogénico. O sinal de fluorescência aumenta devido à separação do corante de fluorescência e do supressor devido à atividade da exonuclease da Taq DNA-polimerase durante a amplificação. A PCR consiste em ciclos repetidos: desnaturação do ADN à temperatura, recozimento do iniciador e síntese da cadeia complementar.
O valor do ciclo limiar (Ct) é um número de ciclos em que a fluorescência gerada numa reação ultrapassa o limiar e o sinal de fluorescência aumenta significativamente acima do fundo.
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