o "Molgen DNA HPV 16/18 S1 Kit" é um kit de ensaio para a deteção do ADN do papilomavírus tipo 16 e 18 pelo método PCR em tempo real.
Introdução
o "Molgen DNA HPV 16/18 S1 Kit" foi concebido para detetar o ADN do papilomavírus humano tipo 16 e 18 isolado de amostras clínicas utilizando o kit de extração: "MOLgen Universal Extraction Kit" (kit de extração universal MOLgen).
O ensaio baseia-se no método de reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real com deteção fluorescente do produto amplificado.
O kit contém os reagentes necessários para 96 testes, incluindo amostras de controlo.
O kit está validado para utilização com o iQ5 iCycler (Bio-Rad, EUA). O kit também é compatível com os sistemas de PCR CFX96 (Bio-Rad, EUA) e DT-96 (DNA-Technology, Rússia).
o "Molgen DNA HPV 16/18 S1 Kit" foi concebido para a análise de materiais clínicos (raspagens de células epiteliais e urina).
Princípio do método
A PCR em tempo real baseia-se na deteção da fluorescência, produzida por uma molécula repórter, que aumenta à medida que a reação prossegue. A molécula repórter é uma sonda de ADN com marcação dupla, que se liga especificamente à região alvo do ADN do agente patogénico. O sinal fluorescente aumenta devido à separação do corante fluorescente e do supressor pela atividade da exonuclease da Taq DNA-polimerase durante a amplificação. O processo de PCR consiste em ciclos repetidos: desnaturação do ADN à temperatura, recozimento do iniciador e síntese da cadeia complementar.
O valor do ciclo limiar - Ct - é o número de ciclos em que a fluorescência gerada numa reação ultrapassa o limiar de fluorescência, um sinal fluorescente que se eleva significativamente acima da fluorescência de fundo.
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