o "Molgen DNA HPV 6/11 S1 Kit" é um kit de ensaio para a determinação diferencial do ADN dos tipos 6 e 11 do papilomavírus humano por PCR em tempo real.
Introdução
o "Molgen DNA HPV 6/11 S1 Kit" destina-se à determinação diferencial do ADN do papilomavírus humano (HPV) dos tipos 6 e 11 através do método da reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real com deteção por fluorescência do produto amplificado.
O conjunto 1 destina-se a ser utilizado com cicladores de PCR de tipo bloco: iQ5 iCycler, CFX96 (Bio-Rad, EUA), DT-96 (DNA-Technology, Rússia).
O kit de ensaio pode ser utilizado na prática clínica para testar material clínico.
A extração do ADN dos tipos 6 e 11 do papilomavírus humano (HPV) a partir de amostras clínicas pode ser efectuada utilizando o "Molgen Universal Extraction Kit".
O conjunto 1 contém os reagentes necessários para 96 testes, incluindo amostras de controlo.
Princípio do método
A PCR em tempo real baseia-se na deteção da fluorescência produzida por uma molécula repórter, que aumenta à medida que a reação prossegue. A molécula repórter é uma sonda de ADN com marcação dupla que se liga especificamente à região alvo do ADN dos agentes patogénicos. O sinal de fluorescência aumenta devido à separação do corante de fluorescência e do supressor pela atividade da exonuclease da Taq DNA-polimerase durante a amplificação. A PCR consiste em ciclos repetidos: desnaturação do ADN à temperatura, recozimento do iniciador e síntese da cadeia complementar.
O valor do ciclo limiar (Ct) é um número de ciclos em que a fluorescência gerada numa reação ultrapassa o limiar e o sinal de fluorescência aumenta significativamente acima do fundo. O aumento do sinal deve-se à utilização de uma sonda de hibridação de ADN específica para a sequência de ADN em causa
---