o "MOLgen DNA Mycoplasma hominis S1 Kit" é um kit de ensaio para a deteção do ADN do Mycoplasma hominis pelo método de PCR em tempo real.
Introdução
o "MOLgen DNA Mycoplasma hominis S1 Kit" foi concebido para detetar o ADN do Mycoplasma hominis isolado de amostras clínicas utilizando o "MOLgen Universal Extraction Kit".
O ensaio baseia-se no método de reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real com deteção fluorescente do produto amplificado.
O kit contém os reagentes necessários para 96 testes, incluindo amostras de controlo.
O kit está validado para utilização com o iQ5 iCycler (Bio-Rad, EUA), o CFX96 (Bio-Rad, EUA) e o DT-96 (DNA-Technology, Rússia).
o "MOLgen DNA Mycoplasma hominis S1 Kit" foi concebido para a análise de materiais clínicos (saliva, urina, raspagens de células epiteliais).
Princípio do método
A PCR em tempo real baseia-se na deteção da fluorescência produzida por uma molécula repórter, que aumenta à medida que a reação prossegue. A molécula repórter é uma sonda de ADN com marcação dupla que se liga especificamente à região alvo do ADN dos agentes patogénicos. O sinal de fluorescência aumenta devido à separação do corante de fluorescência e do supressor pela atividade da exonuclease da Taq DNA-polimerase durante a amplificação. A PCR consiste em ciclos repetidos: desnaturação do ADN à temperatura, recozimento do iniciador e síntese da cadeia complementar.
O valor do ciclo limiar (Ct) é um número de ciclos em que a fluorescência gerada numa reação ultrapassa o limiar e o sinal de fluorescência aumenta significativamente acima do fundo. O aumento do sinal deve-se à utilização de uma sonda de hibridação de ADN específica para a sequência de ADN em causa: liga-se a uma das cadeias de ADN no decurso da reação e proporciona uma especificidade adicional ao método.
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