O kit de reagentes destina-se à determinação diferencial de polimorfismos de nucleótido único do sistema de coagulação e do ciclo do folato por PCR em tempo real com deteção de curvas de fusão. Os kits contêm reagentes apenas para PCR em tempo real.
Introdução
o "Molgen Genetics Haemostatic Disease (MTR/MTRR/MTHFR) Kit" destina-se à determinação diferencial de 4 polimorfismos de nucleótido único (MTR:2756 A/G; MTRR:66 A/G; MTHFR:677 С/T e MTHFR:1298 А/C) em genes do ciclo do folato humano por reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real, seguida da fusão de produtos de hibridação com uma etiqueta fluorescente e da deteção de curvas de fusão.
O kit destina-se a ser utilizado com o ciclador de PCR de tipo bloco CFX96 (Bio-Rad, EUA), como o Adaltis AmpliLab.
O kit de ensaio pode ser aplicado na prática clínica para um estudo abrangente dos factores genéticos que aumentam o risco de perturbações no ciclo do folato.
A extração de ADN humano de amostras clínicas (epitélio bucal, sangue total) é efectuada utilizando o kit "MOLgen Universal Extraction Kit".
O kit foi concebido para a análise de 48 amostras, incluindo amostras de controlo.
Princípio do método
O princípio do método baseia-se na amplificação da região de ADN humano selecionada, seguida da deteção de curvas de fusão de complexos híbridos em produtos de PCR e sondas específicas. O processo de amplificação consiste em ciclos repetidos: desnaturação da matriz de ADN à temperatura, recozimento de primers com sequências complementares da matriz de ADN e síntese de uma cadeia complementar a partir destes primers com Taq polimerase.
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