o "MOLgen Genetics Interleukin 28B Kit" é um kit de ensaio para a determinação de polimorfismos de nucleótido único do gene da interleucina 28B utilizando a reação em cadeia da polimerase em tempo real com deteção de curvas de fusão.
Introdução
o "MOLgen Genetics Interleukin 28B Kit" foi concebido para a determinação de polimorfismos de nucleótidos simples do gene da interleucina 28B utilizando a reação em cadeia da polimerase em tempo real com deteção de curvas de fusão. O kit destina-se à determinação diferencial dos polimorfismos de nucleótido único rs12979860 C/T e rs8099917 T/G do gene da interleucina 28B (IL28B) utilizando a reação em cadeia da polimerase (PCR) com fusão de produtos de hibridação com uma etiqueta fluorescente e análise de curvas de fusão.
A extração de ADN de material clínico pode ser efectuada utilizando o kit: "MOLgen Universal Extraction Kit".
O kit destina-se a ser utilizado com o ciclador de PCR em tempo real CFX96 (Bio-Rad, EUA).
O kit foi concebido para testar 48 amostras, incluindo amostras de controlo.
Princípio do método
O princípio do método baseia-se na amplificação da região de ADN humano selecionada, seguida da deteção de curvas de fusão de complexos híbridos em produtos de PCR e sondas específicas. O processo de amplificação consiste em ciclos repetidos: desnaturação da matriz de ADN à temperatura, recozimento de primers com sequências complementares da matriz de ADN e síntese de uma cadeia complementar a partir destes primers com Taq polimerase.
Após a reação de amplificação, a diminuição da temperatura resulta na hibridação da sonda de ADN específica com o produto da amplificação e numa diminuição do sinal fluorescente no tubo.
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