Kit de reagentes em solução MOLgen

para PCR em tempo realclínicopolimorfismo de nucleotídeo único

O kit de reagentes foi concebido para a determinação do polimorfismo de nucleótido único do gene MCM6 - 13910C/T por PCR em tempo real com deteção de curvas de fusão. Os kits contêm reagentes apenas para PCR em tempo real. Introdução o "MOLgen Genetics MCM6 Kit" destina-se à determinação do polimorfismo de nucleótido único -13910 C/T no gene MCM6 (local regulador do gene LCT, que codifica a lactase) em amostras clínicas (sangue total, epitélio bucal) utilizando o método de reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real com análise da curva de fusão. A extração de ADN de amostras clínicas pode ser realizada utilizando o "MOLgen Universal Extraction Kit" fabricado pela Adaltis S.r.l. Os resultados da análise PCR são tidos em conta em diagnósticos complexos de doenças. O kit destina-se a ser utilizado com cicladores de PCR de tipo bloco: AMPLIlab (Adaltis), CFX96 (Bio-Rad, EUA). O kit contém os reagentes necessários para 48 testes, incluindo amostras de controlo. Princípio do método O princípio do método baseia-se na amplificação da região de ADN humano selecionada, com a subsequente formação de duplexes híbridos do produto de PCR com a sonda de ADN específica e a deteção de curvas de fusão dos duplexes. A etapa de amplificação consiste em ciclos repetidos: desnaturação térmica do modelo de ADN, recozimento dos iniciadores em locais específicos do modelo de ADN e extensão dos iniciadores com Taq polimerase. Após a etapa de amplificação, a temperatura é reduzida e a sonda específica de ADN marcada com fluorescência hibridiza com o produto da amplificação marcado com um inibidor, o que resulta na diminuição do sinal fluorescente. Durante a fase de fusão, a sonda de ADN é libertada, o que leva ao aumento da fluorescência.