Opal™ é um fluxo de trabalho prático para a deteção simultânea de até 6 biomarcadores tecidulares e contracoloração nuclear, numa única imagem. O método é semelhante à imunohistoquímica padrão e é acessível a muitos laboratórios onde é efectuado o desenvolvimento de métodos IHC padrão. Os pacotes de reagentes Opal Fluorophore autónomos permitem-lhe escolher a quantidade e o desenho do biomarcador do seu painel.
O Pacote de Reagentes Opal 780 é uma reação de duas partes e faz parte do fluxo de trabalho de lâminas inteiras de 7 cores Phenoptics 2.0. O Pacote de Reagentes contém:
Opal TSA-DIG, 1 frasco
Opal Polaris 780, 1 frasco
Dimetilsulfóxido (DMSO), 1 x 100 uL
Os utilizadores devem adquirir os anticorpos primários e outros reagentes de fluxo de trabalho separadamente. A embalagem contém reagente suficiente para corar até 50 lâminas. Geralmente, são necessários 100-300 µL de Solução de Trabalho Opal por lâmina.
Protocolo para reconstituição e diluição do Opal TSA-DIG:
Dissolver o Reagente Opal TSA-DIG em 75 uL de DMSO.
Antes de cada procedimento, diluir o Opal TSA-DIG em Diluente de Amplificação 1X Plus para coloração manual ou em Diluente de Amplificação 1X Plus Automation para automatização, de modo a obter a Solução de Trabalho Opal TSA-DIG. O rácio de diluição recomendado é de 1:100.
Protocolo para reconstituição e diluição do Opal 780:
Dissolver o Reagente Opal 780 em 300 uL de ddH2O.
Antes de cada procedimento, diluir o Opal 780 em Diluente de Bloqueio/Ab para obter a Solução de Trabalho Opal 780. O rácio de diluição recomendado é de 1:25.
Os Pacotes de Reagentes Opal podem ser utilizados para a coloração de tecidos mono e multiplex e foram configurados e validados para a imagiologia no sistema de imagiologia de patologia quantitativa PhenoImager HT (anteriormente Vectra® Polaris™).
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