Esta mancha é útil para a detecção de trofozoítos móveis da espécie Entamoeba
LARANJA ACRIDINA (ACETATO TAMPONADO)
A adição de Acridine Orange a um concentrado fecal realça as barras cromidiais de Entamoeba coli, Entamoeba histolytica/dispar e Entamoeba hartmanni, que fluorescem de verde brilhante.
FENOL DE AURAMINA (LEMPERT)
Método
1. Fazer esfregaços fecais como para ZN e fixar em metanol.
2. Mancha com Auramine-Phenol (Lemperts) durante 10 - 15 min.
3. Enxaguar bem em água da torneira.
4. Decolorir em álcool ácido (como para ZN).
5. Enxaguar bem em água da torneira.
6. Contra-mancha com permanganato de potássio a 0,1% durante 30 segundos.
7. Enxaguar bem em água da torneira, deixar secar ao ar. Não seque, muitas marcas de papel mata-borrão irão fluorescer!
O resultado é que os Oocistos aparecem como discos amarelos brilhantes contra um fundo escuro.
SOLUÇÃO DE MANCHA DO CAMPO A E SOLUÇÃO B
N.B. Ambas as soluções estão prontas a ser utilizadas e não devem ser diluídas.
Esta técnica é um método de coloração rápida de Field, que permite a coloração rápida de filmes finos fixos de várias amostras clínicas. Este método particular é muito útil para a coloração de filmes de fezes não formadas, exsudados fecais, aspirados duodenais, etc.
Método
1. Fazer uma película fina de fezes/exsudado e deixar secar.
2. Fixação em metanol durante 1 min.
3. Deslize de inundação com 1 ml de mancha B do campo.
4. Adicionar imediatamente um volume igual de mistura de Field's Stain A bem na lâmina e deixar manchar durante 1 minuto.
5. Enxaguar bem com água da torneira e secar.
6. Examinar o filme utilizando o objectivo de imersão de óleo e óleo de imersão
Resultados
Núcleos e estruturas parasitas contendo cromatina - vermelho
Citoplasma - cinzento-azulado
Núcleos leucocitários - púrpura
Leveduras e bactérias - azul escuro
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