Este reagente destina-se à determinação quantitativa in vitro da bilirrubina total no soro humano.
METODOLOGIA
Este método da bilirrubina total baseia-se numa modificação do método de Pearlmen e Lee, em que se utiliza um tensioativo como solubilizante. O nitrito de sódio é adicionado ao ácido sulfanílico para formar ácido sulfanílico diazotizado. A bilirrubina presente na amostra reage com o ácido sulfanílico diazotizado para produzir azobilirrubina, que absorve fortemente a 550 nm. A absorvância medida a 550 nm é diretamente proporcional à concentração total de bilirrubina na amostra.
REAGENTE
PREPARAÇÃO Todos os reagentes estão prontos a utilizar.
DETERIORAÇÃO DOS REAGENTES
Não utilizar o reagente se:
1. Presença de partículas e turvação.
2. Evolução da cor em R2.
NTERFERÊNCIA
Uma lista exaustiva de medicamentos e substâncias que podem interferir com o ensaio da Bilirrubina Total. Hemoglobina: Sem interferência até 500 mg/dL. Lipemia: Não interfere na presença de triglicéridos até 1500 mg/dL. O ácido ascórbico é interferente.
EQUIPAMENTO ADICIONAL NECESSÁRIO MAS NÃO FORNECIDO
1. Espectrofotómetro ou colorímetro que meça a absorvância a 555 (530-580) nm.
2. Água desionizada e equipamento conexo, por exemplo: pipetas
3. Consumíveis específicos do analisador, por exemplo: copos de amostra
4. Materiais de controlo e de calibração.
Notas de procedimento
Para a determinação da bilirrubina em recém-nascidos, pipetar 10 µL de amostra. Multiplicar o resultado por 2.
CALIBRAÇÃO
pode ser utilizado o calibrador de soro dos produtos bt ou o calibrador de bilirrubina.
CONTROLO DE QUALIDADE
A integridade da reação deve ser monitorizada através da utilização de um controlo de dois níveis com valores conhecidos de bilirrubina total.
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