Para a determinação quantitativa da imunoglobulina IgG no soro ou plasma humanos.
PRINCÍPIO DO MÉTODO
Os anticorpos IgG anti-humanos, quando misturados com amostras que contêm IgG, formam complexos insolúveis. Estes complexos provocam uma alteração da absorvância, dependente da concentração de IgG da amostra do doente, que pode ser quantificada por comparação com um calibrador de concentração conhecida de IgG. REAGENTES R1 (DILUENTE): Tampão Tris 20 mmol/L, PEG 8000, Ph 8.3. Azida de sódio 0,95 g/L. R2 (ANTIBORPO): Soro de cabra, IgG anti-humana, pH 7,5. Azida de sódio 0,95 g/l CALIBRAÇÃO (Opcional) Recomenda-se a utilização de um calibrador de proteínas séricas.
PREPARAÇÃO DOS REAGENTES
Os reagentes estão prontos a utilizar.
DETERIORAÇÃO DOS REAGENTES
Presença de partículas e turvação.
EQUIPAMENTO ADICIONAL
1. Espectrofotómetro ou fotómetro termoestável a 37ºC com um filtro de 600 nm (580-620) nm.
2. O Serum Proteins Calibrator e o Serum Proteins Control são recomendados para procedimentos de ensaio manuais e automatizados.
PROCEDIMENTO
Comprimento de onda: 600 nm (580-620)
Temperatura de trabalho : 37°C
Percurso ótico : 1 cm
Tipo de ensaio : Turbidimetria
Direção : Crescente
CÁLCULO
Calcular a diferença de absorvância (A2-A1) de cada ponto da curva de calibração e representar os valores obtidos em função da concentração de IgG de cada diluição do calibrador. A concentração de IgG na amostra é calculada por interpolação dos seus valores (A2-A1) na curva de calibração.
CONTROLO DE QUALIDADE
Recomenda-se o controlo das proteínas do soro para monitorizar o desempenho dos procedimentos de ensaio manuais e automatizados. Cada laboratório deve estabelecer o seu próprio esquema de controlo de qualidade e acções correctivas se os controlos não cumprirem as tolerâncias aceitáveis.
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