Para a determinação quantitativa da imunoglobulina IgM no soro ou plasma humanos.
PRINCÍPIO DO MÉTODO
O IgM é um teste turbidimétrico quantitativo para a determinação de IgA no soro ou plasma humanos. Os anticorpos IgM anti-humanos, quando misturados com amostras que contêm IgM, formam complexos insolúveis. Estes complexos provocam uma alteração da absorvância, dependente da concentração de IgM da amostra do doente, que pode ser quantificada por comparação com um calibrador de concentração conhecida de IgM.
REAGENTES
R1 (DILUENTE): Tampão Tris 20 mmol/L, PEG 8000, pH 8,3. Azida de sódio 0,95 g/L.
R2 ((ANTICORPO): Soro de cabra, IgM anti-humano, pH 7,5. Azida de sódio 0,95 g/L.
CALIBRAÇÃO (Opcional)
Recomenda-se a utilização de um calibrador de proteínas séricas.
PREPARAÇÃO DE REAGENTES
Os reagentes estão prontos a utilizar.
INTERFERÊNCIAS
Bilirrubina (20 mg/dL), hemoglobina (10,0 g/dL), lipemia (5g/L) não interferem. O fator reumatoide pode interferir a 900 UI/mL.
PROCEDIMENTO
Comprimento de onda: 340 nm (320-360 nm)
Temperatura de trabalho : 37°C
Percurso ótico : 1 cm
Tipo de ensaio : Turbidimetria
Direção : Crescente
1. Colocar os reagentes e o fotómetro (suporte de cuvetes) a 37°C.
2. Ajustar o instrumento ao zero com água destilada. 3. Pipetar para um tubo de ensaio.
4. Misturar e ler a absorvância (Abs.1) após a adição da amostra ou do calibrador.
5. Pipetar para um tubo de ensaio
6. Misturar bem e ler a absorvância (Abs.2) dos calibradores e da amostra exatamente 2 minutos após a adição do R2.
CÁLCULO
Calcular a diferença de absorvância (Abs.2-Abs.1) de cada ponto da curva de calibração e representar graficamente os valores obtidos em função da concentração de IgM de cada diluição do calibrador.
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