Kit de reagentes de aspartato aminotransferase (AST) GOT-11 series

em soluçãode química clínicade NAD

Para a determinação quantitativa da aspartato aminotransferase (AST) no soro humano. METODOLOGIA Karmen desenvolveu um procedimento de ensaio cinético em 1955, baseado na utilização de malato desidrogenase e NADH. Os procedimentos optimizados foram apresentados por Henry em 1960 e por Amador e Wacker em 1962. Estas modificações aumentaram a exatidão e reduziram o efeito de substâncias interferentes. O IFCC publicou um método recomendado que incluía a P-5-P em 1978. O presente método baseia-se nas recomendações da IFCC, mas não contém P-5-P, uma vez que a maioria das amostras contém quantidades adequadas deste cofator para a recuperação total da atividade da AST. Princípio A aspartato aminotransferase (AST) catalisa a transferência do grupo amino do Laspartato para o α-cetoglutarato, produzindo oxalacetato e L-glutamato. O oxalacetato sofre uma redução com a oxidação simultânea de NADH em NAD na reação indicadora catalisada pela malato desidrogenase (MDH). A taxa resultante de diminuição da absorvância a 340 nm é diretamente proporcional à atividade da AST. A desidrogenase láctica (LDH) é adicionada para evitar a interferência do piruvato endógeno, normalmente presente no soro. PREPARAÇÃO DOS REAGENTES Preparar o reagente de trabalho misturando 4 partes de reagente R1 com 1 parte de reagente R2 (por exemplo, 200 µL de R1 com 50 µL de reagente R2) DETERIORAÇÃO DO REAGENTE Não utilizar o reagente se: 1. A absorvância inicial a 340nm for inferior a 1,0. 2. O reagente não cumpre os parâmetros de desempenho declarados. MATERIAIS NECESSÁRIOS MAS NÃO FORNECIDOS 1. Dispositivos de pipetagem exactos. 2. Tubos de ensaio/rack. 3. Temporizador. 4. Espectrofotómetro com capacidade de leitura a 340 nm. (UV) 5. Banho/bloco de aquecimento (37°C).