Este produto é uma mistura principal de um tubo para eliminação genómica e transcrição reversa, que pode conseguir a remoção de ADN genómico e a síntese de cDNA ao mesmo tempo numa operação de um único passo, evitando eficazmente o risco de contaminação da amostra e a degradação do ARN causada por adições complexas. O produto contém uma transcriptase reversa RScript II altamente potente, que sintetiza a primeira cadeia de cDNA a partir de quantidades muito baixas de RNA total ou mRNA poli(A), tornando-a adequada para a transcrição reversa de modelos de RNA com elevado conteúdo de GC e estruturas complicadas. A enzima tem uma estabilidade térmica muito melhorada, capaz de tolerar a temperatura de reação até 65°C e obter um maior rendimento de cDNA sintetizado. Com a adição da dsDNase sensível ao calor, o ADN genómico residual pode ser removido da amostra à temperatura ambiente. A inativação a 50°C não afecta o cDNA. O 5×RScript II All-in-One RT Buffer optimizado é pré-misturado com o Random Primer e o Oligo18 (dT), compatível com a digestão genómica e a síntese de cDNA. As transcrições reversas são compatíveis com qPCR de corante e sonda para posterior análise da expressão genética.
Desempenho da transcrição reversa do RK003-0050
Utilizando 100 ng, 10 ng, 1 ng de ARN de células Hela como modelos, o RK003-0050 foi comparado com dois concorrentes em reacções de transcrição inversa seguidas de qPCR. As curvas de amplificação mostraram um excelente desempenho, especialmente a baixas concentrações de modelo, ultrapassando os concorrentes.
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