Reagente solução de coloração AgNOR

para histologiapara citologia

Preparado para o processamento de amostras cito-histológicas a examinar em microscopia ótica. Método para a evidenciação das proteínas argentafins (100 kD) presentes na região organizadora nucleolar (NOR) em secções incluídas em parafina e esfregaços. PRINCÍPIO A reação argirófila baseia-se na capacidade intrínseca da proteína nucleolar 100 kD - que, juntamente com a RNA polimerase I, forma os “AgNOR”, isto é, as proteínas ligadas aos NOR e evidenciáveis mediante impregnação argêntica - de atuar como substância redutora sobre o ião prata presente na solução, ligando-o na forma reduzida de prata metálica. Aquando da utilização, a solução de nitrato de prata é misturada com uma solução que contém um hidrocoloide carregado positivamente que favorece o contacto entre os grupos redutores presentes nas proteínas nucleolares e o ião prata na solução. ADVERTÊNCIAS - Para as lavagens é indispensável o uso de água destilada de ótima qualidade. - Não use lâminas revestidas a polilisina. MÉTODO 1) Hidrate a secção com água destilada. 2) Processamento da solução de trabalho: coloque o recipiente para lâminas no respetivo suporte de poliestireno. Introduza no recipiente todo o conteúdo de um frasco A e 10 ml do reagente B. Agite alguns instantes com uma vareta de vidro previamente lavada em água destilada. 3) Introduza a secção na solução e incube na obscuridade durante 30 minutos à temperatura ambiente. 4) Lave cuidadosamente em três mudas de água destilada. 5) Deite na secção 10 gotas do reagente C: deixe atuar durante 1 minuto. 6) Lave em água destilada. 7) Desidrate através da série ascendente dos alcoóis; xileno e bálsamo.