Reagente solução de coloração Colloidal iron

para histologiapara citologia

Preparado para o processamento de amostras cito-histológicas a examinar em microscopia ótica. Método indicado para a visualização de mucinas ácidas. Especificidade: a reação evidencia as mucinas ácidas (sialo e sulfomucinas) cujos grupos ácidos ao pH da reação se encontram na forma aniónica, sendo por isso capazes de formar um complexo estável com o ferro trivalente positivo. PRINCÍPIO O método baseia-se na interação que, a um pH fortemente ácido, se estabelece entre o ferro coloidal e os grupos ácidos da cadeia mucopolissacarídea. Nestas condições o ferro forma um composto de quelação detetável com o método de azul de Prússia: o ferrocianeto de potássio, reagindo em ambiente ácido com os iões férricos do quelato, forma um sal insolúvel colorido: o azul da Prússia. A reação, na forma iónica, ocorre do seguinte modo: 4 Fe++ + 3K4 Fe(CN)6 = Fe4 Fe(CN 6)3 + 12 K+ MÉTODO 1) Hidrate a secção com água destilada. 2) Deite na secção 10 gotas do reagente A: deixe atuar durante 2 minutos. 3) Equipe a câmara húmida do seguinte modo: embeba o disco de papel do filtro em cerca de 1 ml de água destilada, sem lavar, escorrendo a lâmina e colocando-a na câmara. Coloque na secção 5 gotas do reagente B e 5 gotas do reagente C, feche a tampa e incube durante 1 hora. 4) Sem lavar, deixe escorrer a lâmina e deite 10 gotas do reagente D: deixe atuar durante 1 minuto. Deixe escorrer e repita a passagem. 5) Sem lavar, deixe escorrer a lâmina e deite 10 gotas do reagente E: deixe atuar durante 1 minuto. Deixe escorrer e repita a passagem. 6) Lave em água destilada.