Preparado para o processamento de amostras cito-histológicas a examinar em microscopia ótica. Método para a evidenciação da amiloide em secções de tecido.
PRINCÍPIO
O método é considerado empírico porque não é claro se a ligação que se forma entre o amiloide e o colorante se deva aos componentes proteicos ou aos polissacarídeos do próprio amiloide, ou mesmo a ambos. Está, em todo o caso, fora de discussão que a substância amiloide, após a coloração com Vermelho Congo, apresente uma acentuada birrefringência ao exame sob luz polarizada. Esta anisotropia leva à dedução que a amiloide possa ter um ordenamento molecular intrínseco que é fortemente acentuado pela ligação com o Vermelho Congo. Segundo Wirchow e, posteriormente, Puchtler, a amiloide é o único componente dos tecidos humanos que apresenta características histoquímicas semelhantes às da celulose, pelo que se supõe que o corante se liga a ela por meio de pontes de hidrogénio, isto é, da mesma forma da ligação celulose-Vermelho Congo.
MÉTODO
1) Hidrate a secção com água destilada.
2) Deite 10 gotas do reagente A na secção: deixe atuar durante 15 minutos.
3) Lave em água destilada.
4) Deite na secção 10 gotas do reagente B: deixe atuar durante 30 segundos.
5) Lave em água corrente da fonte durante 5 minutos.
6) Deite na secção 10 gotas do reagente C: deixe atuar durante 2 minutos.
7) Deite na secção 10 gotas do reagente D: deixe atuar durante 5 minutos.
8) Vire em água da fonte durante cerca de 5 minutos.
9) Desidrate através da série ascendente dos alcoóis; xileno e bálsamo