Reagente DNA polimerase Titan HotTaq

para pesquisapara PCR

A Titan HotTaq DNA Polymerase (Fig. 1) é uma Titan Taq DNA Polymerase modificada. À temperatura ambiente é inactiva, não tendo qualquer actividade de polimerase. A Titan HotTaq DNA Polymerase é activada por uma incubação de 15 minutos a 95-97°C, impedindo a extensão de primers recozidos de forma não específica e de primers-dímeros formados a baixas temperaturas durante a preparação da PCR. A enzima tem actividade de substituição da exonuclease dependente da polimerização 5' a 3', mas não tem actividade de exonuclease 3' a 5'. A enzima tem "actividade de extensase" que permite a clonagem TA. Concentração: 5 unidades/µl Definição da unidade: Uma unidade é definida como a quantidade de enzima necessária para catalisar a incorporação de 10 nmol de dNTP numa forma insolúvel em ácido em 30 minutos a 74°C. Origem: Purificada a partir de uma estirpe de E. coli portadora de um plasmídeo sobreprodutor que contém um gene modificado de Thermus aquaticus DNA Polymerase. Controlo de qualidade: A enzima está isenta de actividades de nicking e priming, exonucleases e endonucleases inespecíficas. SDS/PAGE - banda de 95 kD, >98% de pureza. Actividade e estabilidade testadas por termociclagem. A taxa de erro por nucleótido por ciclo é de ~2,5 x 10-5; a exactidão é de ~ 4 x 104. A meia-vida estimada a 95°C é de 1,5 horas. Armazenamento e tampão de diluição: 50% glicerol (v/v), 20 mM Tris-HCl pH 8,7 a 25°C, 100 mM KCl, 0,1 mM EDTA e estabilizadores. Fornecido com: 10x Tampão de Reacção 1 (Mg2+, sem detergente) Tris-HCl e (NH4)2SO4 10x Tampão de reacção 2 (sem Mg2+) Tris-HCl, (NH4)2SO4 e detergente 25 mM MgCl2 10x Enhancer - Aditivo que facilita a amplificação de modelos difíceis (por exemplo, modelos de ADN ricos em GC).